
摘 要 mjn、5Ⅲin、10min、 采用强度为50kHz的超声波处理“磨盘柿”,处理时间分别为1 果实腐烂率较低,硬度下降缓慢、果肉细胞形状较为完整,保鲜效果较好。 用筛选出的上述试验条件,对“大久保”桃和“八月脆”桃进行处理,研究果实在 10±2℃和2±2℃两种贮藏温度下,超声波处理对两个品种桃品质和生理及果肉显微结 构的影响,分析超声波处理对桃采后品质和生理变化及果肉显微结构的反应机制。试验 结果表明,在相同贮藏条件下,不同品种桃各处理果实的各种表现有所不同,总起来说 八月脆桃的变化幅度较大久保桃小,其中5min处理相比1min和10min处理能减轻桃 果实在贮藏过程中的腐烂和褐变,延缓果实硬度的软化速度及总酸含量的下降速度,有 利于保持果实外观,并能有效增加超氧化物歧化酶(SoD)的活性,抑制过氧化物酶(POD) 的活性,减少丙二醛(MDA)和超氧阴离子(0。一)的积累,降低果实细胞膜电解质的渗透 速度及保持果肉细胞结构的相对完整性,在本试验中除1min处理降低过氧化氢酶(cAT) 的活性外,5min和lO min处理均提高了其活性,减少过氧化氢(H202)含量的积累, 超声波处理均不同程度降低桃果实脂氧合酶(LOx)的活性,减轻其冷害程度,从而延 长了桃果实的贮藏时间。 关键词:超声波:柿果:桃;品质;生理;显微结构 .II E胁ctsofUlt瑚soundWave7IhatmentonPostharvestF阳its and andCenMicm-stmcture QualityPhysio量ogy WaⅡgJing(M旬or:Fm溉andve龄tables戳on窜e) Xhe-w蛳 Pmf.Li byProf.Hang髓o,LiLI-plng,A占sodate supervjsed Absb氇ct: fhitwastreatcdwiIhultmsoundwaVefor1 min,5min,10 DfD华y,w妇舸pe璐immon minwiththe oftheultrasoundin200Wand1 minin min,20min,25lllin,30 power min,10 and of fruit cold ceUmjcro-stnlcmrc changes during 250W尬spc圮tably,qualjty persimmon tIIat waslowerIhaIIof showedlhe that inVesligated.It storagc(1±1℃,70d)were rott%degree contfolintrcatedfhIitswith1min,5 minin200Wandneshfinllnessdeclined mjn,10 slowly aIldthe缸litceIImicr0一slmcturewell. kept treatedwith waVefor1 Ohlba柚dSaIIshisanhaowere ult伯sOund mjn,5mjn, peaches wcre and 10miniⅡ200Wwhichselectedinthat experiment,qualityphysiologicalchanges 卸dceUmicm—stmcture0ftwokindsof 10±2℃柚d peachesdu血g 2±2℃temperaturc were showedthatt置le stOfagefesp∞tablyinVestigated,It quality卸dphysiologicalrespOnses of撕Ovafictics wercdiffercntinthes锄e Of 0f condition,the pe∞hes stomge responscs SanshjsanllaopeachtoultfasoundwavewaslowerthanthatofOI【uba.The5mintreatment the Ⅱ0t dccreasedmemttenandbrown勰1【e0f als0 dedjnesof only pe∞hes,butdelayed fimness觚d∞lublesolidandcont曲tofti啊cacidwrhichwercbenefittO f九l“ peach 5mintrcatmentincrcasedSoD mePOD andthe 印pea舢ce;T1le actiVity,dcc∞弱edactivity accumulationof MDAaIldthecellmembmne thefruitcell 02一and pe皿eability,and well thaIl min锄d10 5 micfo·stmcturewas the1 mintreatmeⅡts.Theminand10 obViously of mintreatmentsincfe弱ed anddecrcasedtheaccumulatjonbutthe1min C-蛆’activity H202 thetreatmentsdecreasedLOX anddecreasedthe of treatment,and actiVity chjllinginjury atdi饪erent peachdllring曲Dragedegrees. words:Ultrasound Micro—stnlcture Key .m. 英文略写表 英文略写 中文名称 英文名称 CAT 过氧化氢酶 Catalase H202 过氧化氢 HypersensitiVe response LOX 脂氧合酶 Or LipoxygenaseUpOxiase MDA 丙二醛 Malondialdehyde 0。, 超氧化物阴离子 radicalanion Superoxide POD 过氧化物酶 PeroxidaSe SOD 超氧化物歧化酶 dis缸nuase Superoxide EDlA 乙二氨四乙酸 acid y873615 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中 不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得新疆农业大 学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对 本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 …繇措 贰间:2≯6年6目f{日 { 关于学位论文使用授权的说明 本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:新 疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文 档,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,允许论 文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索,可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议1 研究生签名 时间:汹/年/月t/.曰 导师签名: 哎圊;圳年≤茜听日 { 新疆农业大学硕士学位论文 第一章引 言 1.1国内外超声波的应用现状 超声波作为一种物理能量形式的机械波广泛应用于医学、工业、化学和化工领域。 在医学领域中,超声波被用作进行超声诊断和超声治疗;在工业中利用超声进行流体流 量的测量、超声焊接、超声清洗等;在化学工业中超声波可加速化学反应速度,起催化 作用;在农业中,超声波处理可以提高种子的发芽率、出苗率、提高产量。同其它领域 一样,由于超声波的空化作用“3,使其在生物技术和食品工业的不同领域具有不同的作 用效果。如超声具有抑制和杀灭微生物、激发或抑制酶的活性,能够起到辅助提取、干 燥等,这些特性的运用在具体应用中都有具体体现。 1.1.1超声波的生物效应及其利用 1.1.1.1对微生物的杀灭作用: 已有研究认为,超声波的空化效应具有扰乱微生物细胞的作用瞄。用超声波对酱油 做杀菌对比实验,发现用超声波处理酱油lOmin,杀菌率达75%,略低于巴氏杀菌(72℃) 的78.7%。1。用26 kHz的超声波对微生物作杀菌实验,发现细菌如大肠杆菌、巨大芽胞 杆菌、绿脓杆菌等,对超声波是敏感的,可被完全破坏,但对葡萄球菌、链球菌等效力 较小“1。用超声波法与传统热杀菌法对牛奶中的荧光假单胞菌及嗜热链球菌的失活进行 比较,发现超声波法在温度低于51.7℃时,其空化效应的灭菌效率高,温度升高后, 由于蒸汽压升高及表面张力的下降,其灭菌效率降低。这种特点能满足低温杀菌的要求, 使超声波技术在乳品工业中的应用前景看好。1。 低频高能量的超声波在液体中产生空化效应,对于不规则表面的清洗和杀菌是非常 有效的。空化效应在物体表面产生的射流能够清除表面污物和细菌,而且可以达到传统 清洗杀菌所不能及的表面缝隙中。有研究报道,超声波可配合杀菌剂清洁待孵化的蛋, 与目前所使用的喷药或气熏方法相比,超声辅助清洁的效果更好93。超声波与过氧化氢 氯水结合处理使得新鲜水果蔬菜表面的细菌数量明显降低,空化作用也使得细菌对杀菌 剂更为敏感”1。用0.2%吐温80和超声波相结合清洗西芹后,鲜切西洋芹除菌率可达 80%% 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构的影响 超声波还可与其他物理技术配合来提高杀菌效果,同时还能大幅度地缩短处理时 间。有很多关于结合超声波杀灭食品中及表面的细菌“+2”、产芽孢菌。2制、真菌。”的报 道。 超声波结合热处理对肉汤、脱脂乳、液体鸡蛋中的置却厅j舢r,姗的杀菌效果“…。 在食品工艺中采用该方法时,所需的温度低于传统热处理的温度,即可达至0杀菌的目的, 但与传统热处理方法相比,该方法能量消耗并未降低““。超声波结合uV处理对牛奶中 大肠杆菌““。超声波及结合技术对鸡蛋中沙门氏菌。”都有抑制作用;超声与激光联合杀 菌,可延长液态食品如:果、蔬汁饮料、酒类、牛奶、矿泉水等的货架期,保持食品安 全性,减少腐败菌和微生物污染。“。因为超声是一种机械振动波,一般都是采用纵波(即 粒子的振动方向与波的方向是一致的),雨激光也是一种电磁波,波动过程表现为横波。 如果声光联合使用,则会出现与横波的迭加而产生一些新的声光特性,使整个生化反应 器内部充满了声、光效应。只要激光和超声剂量都掌握得好,产生更高的能量,便能取 得100%的灭菌效果。声光联合杀菌也为无菌包装工艺开辟了新的途径。“。超声一磁化联 合杀菌,效果也比较好。超声波灭菌技术已在美、日、欧洲等发达国家获得了普遍应用, 在我国,这种“冷杀菌工艺’已受到食品行业极大的关注,将会成为21世纪食品工业 研究和推广的重要高新技术之一o“。 超声波除了杀菌之外,还自2有效地控制果实采后病害。”。持续的超声波处理防治苹 果表丽的虫害“…。 1.1.1.2激发缅胞活性,提高食品产量: 超声波可加速微生物细胞的生长,同时可以促进有益代谢产物的合成,这一特性已被 用于提高食品产量。低强度的超声波处理液体培养基,可提高藻类的生长速度和产率,从 而使这些细胞生产的蛋白质产量提高3倍㈣。在适宜超声频率条件下,采用低功率、短时 间超声处理湛江等鞭金藻,生长速率常数最高可达0.630d,是对照组的2.02倍,其脂肪 酸不饱和度最高可达79.6%,比对照组提高78%。“。用频率为32.5kHz,功率为30w的超 声处理酒酵母后,细胞的对数生长期延长,细胞生长速率提高,细胞的干重也有所增加。”。 在脆壁克鲁维氏酵母菊糖酶的发酵生产中引入20kHz,lOw的超声波后,脆壁克鲁维氏 酵母菊糖酶产量提高了1倍以上,这种低强度超声波不会对细胞造成破坏。”。 超声波产生“空穴”作用,可破坏植物细胞和细胞膜结构,从而增加细胞内容物通过细 胞膜的穿透能力。大豆磨浆前后利用超声波处理2次,其豆浆中蛋白质含量比空白提高了 新疆农业大学硕士学位论文 68.98%,可溶性固形物含量提高了67.94%。”。杨胜利等。”采用低强度的超声波,选取作用 时间为变化参数,对红曲细胞迸行每间隔8h作用2fnin处理,效果最明显,证明具有很 强生物学效应的超声波,空化泡绝热收缩至崩溃瞬间,伴有强大的冲击波或射流o”,该作 用可以改变细胞的壁膜结构,使细胞内外发生物质交换,促进其色素的产生和分泌:也可 能在超声波作用下,膜内的流体静压力足够诱导细胞膜机械破裂,从而加速色素的产生和 分泌,或许二者兼而有之的结论。 1.1.1.3对生物酶活性的影响: 超声波在低强度及适宜频率条件下具有空穴作用、磁致伸缩作用和机械振荡作用, 改变酶分子构象,促进细胞代谢过程中底物与酶接触,促进产物的释放,从而促进酶的 生物活性m3。也有研究发现超声波在一定条件下却能够使某些酶的活性下降。 食品工业中生产低乳糖含量的酸牛奶时,引入超声作用,可使B一半乳糖昔酶活力 明显提高,乳糖浓度减少71%一74%,非超声时仅减少39%一51%m1。超声波处理麦芽的乳 状液,液体的淀粉酶活力大幅度提高““。超声激活固定化酶是一个富有成果的研究领域, 如以酪朊作底物,用20 kHz的超声波处理固定于琼脂胶上的d一胰凝乳朊酶,可使其活 性提高2倍啪1。高大维等呻3用超声波处理固定的糖化酶来分解淀粉,发现在一定的超声 波作用范围内,酶的活力提高,丽KⅢ值下降,但该酶的最适pH和最适温度保持不变。 以木薯淀粉为原料,用50 w的超声波处理,可使固定化酶活力提高,生产的异麦芽低 聚糖中二糖、三糖的有效成分含量最多提高7.72%,而对游离酶反应的效果不明显…。 林影等“11认为频率为20kHz,功率为20w的超声波可促进固定化菊糖酶的催化作用, 使得以蔗糖为底物的酶活力提高了60%。Barton等“4研究蔗糖酶水解蔗糖、a一淀粉酶 水解淀粉和糖原时发现,当底物处在一个较低浓度水平时,如果反应系统加以超声能量 的作用,能显著提高这些酶活力,使水解反应更加彻底。 超声波不仅能激发酶的活性,也能抑制酶的活性。用超声处理碱性磷酸酶时,酶 活性比对照下降了10%,连续处理24 溶解子20℃、O.1 mol/L、pH7.O磷酸钾缓冲溶液中,加以20 kHz的超声波3h,酶活 m 性下降了90%““。枯草杆菌蛋白酶在50mol/L,pH 7.8的磷酸缓冲液中,以波长2~10 啪,声功率150w的超声波处理2h,酶活约下降50%m3。在适宜压力下用热处理和超 声波相结合的方法对番茄果实进行处理,该方法的协同作用比常规热处理更能够抑制果 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构的影响 化物酶活性的效率比常用的热处理方法高“”。 可见,超声波的能量对酶促反应的速度有着一定影响,不同酶的活性显示了不同 的作用效果。 1.1.2超声波在食品加工过程中的利用 1.1.2.1物质提取: 超声波能够增大溶剂向原料细胞的渗透量并强化传质,因此明显地加速植物体和种 子中有机成分的提取过程,还可降低提取温度,缩短提取时间,是一种具有发展潜力的 利用外力强化提取的新技术。 1.1.2.1.1蛋白质和酶的提取: 利用超声波法从大豆中提取蛋白质,提取率明显提高呻3。对不同浓度的大豆浆体、 磨前经热处理大豆浆体及其分离出的豆渣,进行超声处理等一系列实验,结果表明,经 超声波处理过的大豆浆体,其豆奶中蛋白质含量均有显著的提高,幅度在12%一20%之间 “…。利用超声波破碎法,通过不同的功率、工作强度的组合,提取花粉管可溶性蛋白, 结果稳定、可靠性强、操作简便,大大缩短提取时间。“。超声波还可帮助从经过变压或 热处理过的脱脂大豆料胚中提取大豆蛋白质,可将80%的蛋白质液化,提取热不稳定的 7S蛋白成分,弥补了用常规搅拌法很难提出热不稳定的7S蛋白成分的缺点。“。超声处 理提高浆体的分离温度,降低浆体粘度,提高出汁率和汁液质量,也可用于直接生产高 浓度(高蛋白)的豆奶产品。“。在提取酶方面,超声波也有效果,用频率20kHz,超声 功率15 w,时间15h提取细胞内的葡萄糖氧化酶,提高了酶产率,且未失活,表明以温 和的超声波条件可应用于胞内酶的连续生产。”。 1.1.2.1.2油脂的提取: 超声技术提取葵花籽中油脂,产量提高27%一28%4“。乙醇提取棉籽油时,使用强 度为1.39 w’/cm2超声处理1h,提取的油量提高8.3倍。“。利用超声波强化溶剂提取海 藻油,能缩短提取时间、提高溶剂利用率和提取率,强化整个提取过程和超滤分离过程, 减少负荷、降低生产成本。“。使用正己烷作为提取溶剂,起声强化提取核桃仁油,可降 低提取温度、缩短提取时间和节省溶剂耗量““。超声波法提取Y一亚麻酸,得到的油量 新疆农业大学硕士学位论文 比匀浆法增加12.8%;采用同样的方法从花生中提取花生油,可使花生油的产量增加2.76 倍…1 超声波除了可以从植物的花、果、籽中提取油之外,也可以较好地提取动物组织中 kHz、600kHz、800kHz、1500 min 的油脂。用300 kHz的声波提取鳕鱼肝油,在2—5 几乎全部提取出组织内的所有油脂,所含维生素未遭破坏,且油脂品质优于传统方法4”。 超声波不仅强化常规流体对物质的浸取过程,还强化超临界状态下物质的萃取过 程。陈钧等””利用超声强化超临界C侥流体,从麦芽胚中提取麦胚油,麦胚油的提取率 可提高约lO%,且未引起麦胚油的降解。 1.1.2.1_3多糖提取: 超声波强化提取玉米芯中的木聚糖,可明显缩短提取时间,降低提取剂的浓度和提 取温度,提取的糖组份和结构无显著差别““。超声波强化提取金针菇子实体多糖,可使 多糖提取率提高76.22%。“。以白芨块茎为原料提取白芨粗多糖,发现室温下超声处理比 较理想嘲。王红…3研究了不同的提取方法对获苓中水溶性多糖含量的影响时发现,以冷 h和热浸1 浸12 h作对比,超声提取1h,其提出率比对照的两种方法高30%。使用超 声波提取魔芋精粉葡甘露聚糖,省时、可靠,能提高魔芋精粉中葡甘露聚糖的提取率。…。 利用超声波辅助热水,从姬松茸中浸提多糖,提取时间缩短0.5h,料液比减小l/3, 提取率提高0.21%,提取液粘度降低15%一20%、表面张力降低5%一10%,对降低此后的超 滤分离的阻力和减少浓差极化的影响,都有经济上的积极意义㈣。念保义等“”采用超声 提取、超滤分离香菇多糖,也得到相似的结论。靳胜英等㈣探讨了银耳子实体多糖的提 取方法,复水完全的子实体经机械粉碎、超声波处理后热水浸提的提取方法,能显著提 高银耳多糖的浸提率,并缩短浸提时间,浸提率比酶法浸提得率的16.3%高出4.69%。 于淑娟”1对超声波催化酶法提取灵芝多糖的机理、最优化方案及降解产品的组分和结构 进行了系统的研究,并对虫草多糖、香菇多糖、猴头多糖的提取进行了研究,与传统工 艺相比,超声波强化提取操作简单,提取率高,反应过程无物料损失和无副反应发生, 是一种可望实用推广的新工艺。 欧阳杰等””利用循环超声强化法提取肉苁蓉中多糖和甜菜碱,多糖的提取量为 46.9 mg/g,甜菜碱的提取量为136.5 mg/g,分别相当于沸水回流7h时提取量的107.3% 和103。8%。赵兵等‘“1使用循环气升式超声波破碎鼠尾藻提取海藻多糖时发现,超声波 在室温下作用20 min,即可达到100℃搅拌4h的多糖提取率,明显高于80℃搅拌4 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构的影响 h的多糖提取率。 1.1.2.1.4其它物质的提取: 在提取姜黄素的过程中,对比Soxhlet法、循环浸取、加热浸取、机械搅拌浸取及 超声场浸取等方法,超声场介入下浸取可明显加快传质速率,缩短浸取时间,提高姜黄 素的浸出率””。超声波浸提茶叶,可提高茶叶中键合态糖苷类香气前体的漫出量,香气 指数可达到常规浸提法的1.80倍,感官评价以超声波浸提茶汤的香气品质比常规浸提 好“”。用超声波提取茶多酚,提取10min的得率比水提取30min的得率提高40%以上, 具有省时、节能、避免茶多酚高温氧化之特点””。采用超声波对盐藻进行破碎,物料破 碎可达87%,使B一胡萝h素能够快速、高效地进入水溶液等提取介质,同时避免了因 w(50 采用化学粉碎方法造成被提取物结构性质等变化而失去活性等“…。利用80 kHz) 的超声波处理罗汉果80min,甜苷提取率可达3.4%,与罗汉果甜苷的理论含量非常接 近㈨。超声水提法提取元宝枫叶比常规水提可以大量节省溶削和提取时间,并得到较高 的提取率“”。通过水浴和超声分别对竹叶黄酮类物质进行提取,水浴法需15倍原料重 min 的75%丙酮水溶液在80℃浸提1h,而超声法只需20倍原料重的75%丙酮水溶液30 浸提,即可达到较好效果m3。霍丹群等””在提取山楂中黄酮类物质时,对超声波法和热 提取法作了综合比较,显示超声波法明显优于热提取法。丁利君等”1研究了用超声波处 理后,再用硫酸铝沉淀法从佛手瓜中提取果胶,果胶产率为34.8%;而普通盐析法的果胶 产率仅为O.58%。用超声波辅助盐析法提取仙人掌果胶,比乙醇沉淀法所得到的果胶量 多,产品质量较好且醇耗量少,能明显缩短工时,节约能源嗽3。以甘草粗粉为原料,用 氨水作溶剂,在超声场的介入下提取甘草酸,可显著缩短提取时间,并获得较高的提取 率嘲。左仁等””以一种香料酯类作为提取溶剂,当超声波输出功率为320w,提取时间 为6min,每次辐射时间为3s,固液比为l:2,提取级数为二级,总色素提取率为96.83%。 利用循环超声强化提取肉苁蓉中苯乙醇糖甙类化合物,提取量为73.8 mg/g,相当于60 ℃甲醇热浸5h的提取量,为索氏抽提法提取量(8l,2mg/g)的90.9%。“。用超声强化 超临界流体萃取(SSFE)辣椒中的辣椒素,也取得了很好的效果,萃取率及萃取容器的 负载量都明显提高㈣。 由此不难看出,超声波提取具有:提取时间短,提取温度低,提取率高、可靠等优点。 1.1.2.2破壁: 超声波处理过程中。“空化效应”释放巨大能量,产生高达几百个大气压的局部瞬 新疆农业大学硕士学位论文 间压力,形成冲击波,使固体表面及液体介质受到极大的冲击力,能量足以使细胞破裂 以达到破壁的目的。超声波在花粉细胞破壁技术上的应用,具有时间短,操作简单,破 壁率基本可以满足生产工艺要求的优点”“。超声波对血细胞破壁的破壁效果最好,,高压 均质法次之,磁力搅拌最差”“。使用超声波从大蒜中抽提SoD,通过超声波破碎细胞可 使s0D的总收率提高3%一5%阿1。超声破碎也为超声提取提供了有效途径。张智维等”81通 过反复冻融和超声波法相结合对油菜花粉进行破壁处理,破壁率高达98.5%,证明这种 方法是可行的,较完整地保存了花粉的营养成分。 1.1.2.3促进渗透: 超声波的空化作用及伴随效应可以起到促进溶液渗透作用。在果脯加工中,与常规 渗糖方法相比,超声波显著提高果蔬组织的渗糖速率,明显降低糖煮对果蔬组织细胞结 构的破坏作用。…。超声波应用于咸蛋的腌制,能降低蛋清粘度,明显促进氯化钠的渗透 和扩散,缩短腌制时间o“ 1.1.2.4对水合物结晶过程的影响: 由于溶液中溶剂与溶质分子的压缩系数与振荡速率不同,超声作用使得溶剂分子迅 速均匀地渗透到高黏度溶质一水缔合网络中,加速夺水成核作用,成核后,超声波作用 使微晶粒产生局部颤动,控制并稳定住晶粒的均衡发展“…。赵茜等。”把超声起晶成核这 一理论应用到结晶B—D葡萄糖的制备中,可制备高纯度B—D葡萄糖的生化试剂,也可 用于制备工业生产过程的晶种,并提出超声波协同溶剂影响成核晶型的作用机理。 超声既可使饱和溶液的固体溶质产生迅速丽平缓的沉淀,又可加速晶体生长。在超 声作用下,液体内会形成大量的结晶中心,且形成的晶体大小受超声频率和强度所控制, 所以利用适当的超声作用可以获得细小而均匀的晶体沉淀物。刘永红等脚1研究了超声波 对水合物HCFc—14lb(1,卜dichl。r。一l 面积为19.6 cm2反应器中的水合物生成;在反应器面积增大至38.5cm2时,水合物结晶 引导时间随超声波功率的升高而缩短,二者近似成对数关系。超声波加速结晶效应在酒. 类催陈中得到应用,能使重酒石酸钾盐的沉淀时间由4一lOd减少到l‘5—2h…1。目前, 该方法已被用于糖浆的结晶过程,得到各种均匀粒度的糖沫。在工业规模生产中,超声 辅助结晶还有一个重要益处,固体沉淀物不会在降温冷却管上沉积,因此可保证系统的 冷却速率得到均匀分布。“。 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构盼肜响 1.1.2.5除沫、脱水与干燥: 强超声辐照在液体表面,会使液体雾化,基于此原理,可以用于消除泡沫。在食品 加工业中有时不能用化学消泡剂来消除泡沫,用强超声消泡效果很好。超声波消泡与化 学法消泡比较,能降低消泡成本,不污染食品,并且也不影响产品质量:与机械消泡法 比较,设备体积小、功率消耗少、消泡效率高滞3。 超声波之所以能辅助干燥加工是因为它能够加速物质的扩散过程。声波处理可以减 小流体与固体表面的边界层,提高浓度梯度,并增大物质的扩散系数啡3,这就为热敏性 稀溶液物料的浓缩干燥提供了一条良好的途径。与高速气体干燥相比,超声干燥不仅减 小了由于高温造成原料氧化或质量下降的可能性,还避免了原料被吹散或破坏等问题。 采用超声波干燥蔗糖,可很快干燥到ll2%含水率,当蔗糖在超声下再处理16min,将 去除所有水分泖1。用超声波和太阳能、温风形成的干燥系统,可将谷物糖浆、番茄沙司 等干燥,水分从5%一7%干燥至O.5%,还可用电气和超声波技术,配合适当压力的装置, 提高一般食品减压过滤或离心分离效率,超声波能加快水分分离,电极间流动的电流及 电荷可使水分移动,提高其脱水效率。”,该技术也适用于耐热性差的高黏度、高纤维性 的难以干燥的食品,如含悬浊液、明胶状食品的脱水。水果泥脱果汁的回收率可从 80%一85%提高到85%一90%。“。超声脱水干燥食品,不仅速度快、时间短、复水性好,而 且食品的色、香、味和营养成分都能很好保存。 1.1.2.6均质和乳化: 利用超声波在液体中的空化作用来达到均质效果。新鲜牛奶中含有大量粒度大小不 等的脂肪球,其上浮会在牛奶表面形成一层奶油层,使牛奶产生分层现象。牛奶的均质 处理就是要击碎牛奶中的脂肪球,使脂肪球的大小显著降低,由2.79—3.08岫降至 O.57一O.95№,使它的上浮力减小甚至消失,从而防止牛奶的分层,达到使牛奶均一化 的效果m1。当超声波频率为40kHz,功率密度O.8w/cm2时,效果最为理想㈣1。 对果汁、果酱等被加工物料施以适当强度的超声波,可使细胞壁破裂,剪切生物大 分子或液体中的分散相均质,达到乳化的效果。超声作用下乳液的形成进行是由于容器 壁附近破裂的气泡使液体残缺不全地射入另一种液体中进一步分散成缅滴而形成“”1。 朱建华等“”1研究了超声波对大豆蛋白表面性质的影响,超声处理提高了大豆蛋白的乳 化能力,与一般的乳化工艺相比,具有乳液液滴小,乳液稳定、乳化质量好、生产效率 高、能耗少及成本低等优点。 新疆农业大学硕士学位论文 1.1.3食品保鲜 利用超声波空化效应在液体中产生的瞬间高温及温度变化、瞬间高压和压力变化, 使液体中某些细菌致死,病毒失活,甚至使体积较小的一些微生物的细胞壁破坏,从而 延长蔬菜等食品的保鲜期“唧。高翔等嘲用超声波气泡清洗西芹后再用O.40%cacl。保鲜 处理,呼吸作用明显受到抑制,多酚氧化酶活性一直处于较低水平,且对V。无明显的破 坏作用,也未造成机械损伤,感官品质优良。李次力等“叫用超声波处理新鲜豆角20一40 s后,再用O.3%一O.5%浓度的魔芋粉进行涂膜,对豆角有明显的保鲜效果,可减少豆角 的失水率,叶绿素的损失很少,在同等条件下豆角的货架期延长了10d以上,但随着 超声波处理时间的延长,将会破坏豆角表面的天然蜡质层,加快了豆角的腐烂。姚松等 。”’研究发现超声波结合水杨酸能够明显提高鸭梨的抗病性,降低果实发病率,提高了与 抗病防御酶PoD的活性,在一定程度上延缓了果实的衰老。欧丽兰等“蚓利用超声波加湿 器管理鲜茶叶,色香味均优于~般贮青方法,尤其是成茶中维生素c和叶绿素含量提高 10%左右。zenker等叫通过对被处理的橘子果汁参数指标进行分析,得出超声辅助加热 的方法能够延长果汁的贷架期,提高果汁的透明度,并在很大程度上保留了L一抗坏血酸 kHz,60 的成分。经50 s,60℃超声波处理的原料乳,营养物质无任何破坏作用,在 15℃条件下保鲜45 h,仍有优良的感官性能“0印。还有研究发现牛乳经15—60s的超声 波处理后,乳液可以保存5d不酸败变质,经一般消毒的牛乳再经超声波处理,在冷藏 条件下可保存18个月o”3。 超声保鲜在花卉培养方面也表现出较好的应用前景。利用超声波与保鲜剂复合(uw 十Ps)预处理可以明显改善切花月季、切花菊、香石竹花茎瓶插期间的水分状况,提高 花茎不同部位的水势、花枝鲜样质量和延长瓶插寿命“唧。保鲜液超声波处理也能保持扶 郎切花的鲜重、使其花梗伸长、瓶插生命力旺盛“…。对素心蜡梅的贮藏保鲜作用的研究, 也证明了uw十Ps的加合效应。超声波可能促进了水分及保鲜剂的快速运输及利用,改 善了切花水分状况、延缓了衰老,因而提高了贮藏保鲜效果“”3。 1.1.4其它方面的作用 在食品解冻方面,其能量来源于超声波在冻肉的衰减产生的热量。超声波在冷冻肉 中的衰减要高于在未冻肉中的衰减,使冷冻部位的外层达到最高温度。与微波解冻相比, 物料表面温度更低,解冻速度更稳定。仅采用超声波对冷冻食品进行解冻,在声频为50 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构的影响 kHz,声强为O.5w/cⅢ2的超声波作用2h后,冻牛肉、猪肉和鳕鱼肉的解冻深度达7.6 cm;肌肉的走向和脂肪层的内含物也对衰减系数和特征声阻有影响““1。相比之下传统的 解冻过程则慢的多。30℃、流速为5.5m/s的空气中完全解冻约15cm厚的猪腿肉需 要5h,而以30℃、流速为O.023m/s的水作介质,完全解冻上述样品仍至少需要4h[1”1。 在肉制品加工方面,超声波可用于破坏肉的肌原纤维,破坏后的肌原纤维会分泌粘 液,增加肉的粘度,起到嫩化肉质的作用,较之传统的滚揉工艺对肉处理效果更好n1“。 把经过真空包装的牛肉,放在高能量(22kHz,22w/cm2)的超声波下处理O.5—10min, 然后放置1.6一lO d,发现经过处理的牛肉结构疏松,易切,随着贮藏时间的延长,红色 减少,橘红色增加“…。 利用低能量超声检测技术对产品质量的检测是当前研究的热点。检测关键在于通过 对声波信号变化的分析,了解产品的成分或组织结构特性…”,主要考察的参数是声速, 在某些特殊情况下也需要辅以声衰减分析和频谱分析““3。目前的研究成果已表明,超声 波技术可以应用于对液体食品中掺假检测和质量的研究,通过乳液或肉质的超声频谱分 析,可鉴别牛奶掺水或肉质结构;还可以利用超声波在流体中的传播速度的不同,确定 流体流速、测定流体流量。与其它检测方法相比,超声检测有其独特的优势,即:非破 坏性、精确、设备廉价。 另外,超声波也越来越多地被用于基因工程中。利用超声波将外源基因导入受体细 胞即是其中的技术之一…“。 超声波在生物技术与食品加工领域中的应用带来了方法学上的创新,对传统的技 术形成了有益的补充。采用这些技术可以缩短加工时间,提高加工效率。就目前而言, 多趋向于研究超声波或与其他技术结合处理作为食品保藏的一种手段,抑制食品中的微 生物以保障食品安全。鉴于上述超声波所能产生的声效应及其协同效应,为其在采后水 果保鲜方面提供了可能性。 1.2试验品种特性 本试验所选试验材料均为华北地区主栽品种。“磨盘柿”(历D妒rr。s幻膏f)、“大久 实既充分成熟,又距完熟有一定的时期。以便于观察采后处理对果实后熟和贮藏期的影 响。 新疆农业大学硕士学位论文 kak{) 、.2.、霭盘楠tD;ospyros 磨盘柿属于涩柿中的中熟品种,在我国分布最广,果实极大,产量高,其营养成分 高,磨盘柿在树上成熟以后,可溶性单宁含量仍然很高,其含量约为0.72%,占总单宁 含量1.62%的44.4%““,涩味极其强烈。 柿子果实的色泽包括叶绿索、类胡萝h索、黄酮类色素等“哪。柿子在后熟过程中, 由于类胡萝h素、黄酮类色素含量明显升高,叶绿紊含量的下降,果实逐渐变成红色“”1, 其中,类胡萝h素的增加以果皮占多数,因为在完熟阶段,果肉中类胡萝b素只有果皮 的1/9。在柿果中,类胡萝卜素主要是B—类胡萝卜素和隐黄质,在完熟的果实中,果 皮含隐黄质18%,果肉中含隐黄质37%“圳,贮藏期间果皮中增加的类胡萝h素主要是 B一类胡萝p素。 有研究发现,该品种属于后期跃变型果实,并且果实硬度下降时,可溶性固性物在 前期增加较多,单宁含量不断减少,果实细胞膜过氧化脂质(丙二醛)在贮藏期呈平缓 的上升趋势“”1。也有研究表明,该品种柿果在贮藏后期易出现褐变,尤以成熟度较差的 青柿最为明显,同时也发现当贮藏温度恒定,保持在0±1℃,其它条件适宜,褐变果几 乎不发生,如果偶然库温降到一2℃以下,超过柿子冰点,即使时间很短,褐变果出现 反应有关“”1。有研究发现,柿子果实在成熟过程中细胞壁发生很大的变化,成熟的柿子 果实其皮下细胞有明显的厚壁化“…。 1.2.2 “大久保”(甜“6a)桃和“八月脆”(Bayuecui)桃 桃有早、中、晚熟品种,主要在6—9月份上市,以7—8月份最多,少数品种可延至 12月份。目前栽培的主要品种有大久保、冈山白、冈山500号、八月脆等,其中“大久 保”和“八月脆”桃分别属于早熟和晚熟品种。 桃属于典型的呼吸跃变型果实,果皮薄,呆肉软,汁多,含水量高,且成熟期多集 中在7_8月,正值高温季节,采后极易腐烂,在低温下贮藏易发生冷害和丧失原有风味, 是比较难贮藏的果品“”3。 呼吸作用是果实采后生命活动的中心,与果实品质变化、贮藏寿命、贮藏中的生理 病变密切相关。桃呼吸跃变开始前,组织内的乙烯浓度很低,在即将发生跃变前,乙烯 明显上升,引起呼吸跃变。桃果实采收后有双呼吸高峰和乙烯释放峰出现,呼吸强度是 采收前的3—4倍,这可能是桃不耐贮藏的重要生理原因“…。 11 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显徽结构的影响 1.3研究目的、意义和内容 目前用于果实保鲜的化学杀菌剂,仍然被广泛使用,然而长期使用给人类的健康造 成不良后果。因此,怎样利用物理技术方法控制果实采后品质值得探讨。 近年来,人们发现超声波在食品加工和产品评价中有着广泛的应用。已有研究认为 超声波的空化效应具有扰乱微生物细胞的作用,低频率高能量的超声波(2plookHz) 在空化过程中压力迅速交替产生的影响,能够打破微生物的结构并且引起细胞壁破裂。 有研究表明,利用超声波空化效应在液体中产生的瞬间高温及温度变化、瞬间高压和压 力变化,使液体中某些细菌致死,病毒失活,甚至使体积较小的一些微生物的细胞壁破 坏,从而延长蔬菜等食品的保鲜期“”3。有关超声波与加热、保鲜剂等方法相结合对食品 进行杀菌保藏已有不少报道,但超声波技术在采后柿果和桃处理中的应用尚未见报道。 本实验研究柿果经超声波处理后在贮藏期间品质和果肉显微结构的变化;桃经超声 波处理后在贮藏期间品质和生理特性及果肉显微结构的变化,为进一步探讨超声波技术 在果实采后综合处理体系中应用的可能性提供依据。 新疆农业大学硕士学位论文 第二章超声波处理条件的筛选 2.1材料与方法 2.1.{试验材料 供试材料“磨盘柿”(历D.驴FrDs七出j)采自北京昌平果园,成熟度8—9成:选择 大小均匀、无损伤果用于本试验。 2.1.2试验仪器 超声波发生器:TcQ一250型超声波清洗器,工作频率50kHz(不可调),输出功率 200w和250w;Dc—P3型全自动色差计(北京市兴光测色仪器公司);GY一1型硬度计; 手持折光仪;生物显微镜(欧林帕斯公司)。 2.1.3试验处理 本试验采用频率为50 30 min和输出功率为250w处理时间为1、10min(后称1miⅡ强、10min强)和对照 (CK)共九个处理。处理后的果实经风干后装入纸箱中,放入1±l℃的冷库中贮藏。 每个处理120个果,做3个重复。 2.1.4测定项目及方法 每隔约14d随机取样,每个重复取4个果实,观察果实的腐烂率和腐烂指数,测定 果实色泽、硬度、可溶性固形物含萤等品质指标,并对果肉细胞做显微结构观察。 1.4.1果实腐烂率和腐烂指数:果实腐烂率(%)=腐烂果实数十100/总果实数;腐烂指数是 为3级,1/2级为4级;腐烂指数=£腐烂果数×腐烂级别/(总果数x最高级别)。 来表示,其中L值代表果面亮度,a值代表果面红色,b值代表果面底色。 l,4.3果实硬度:用GY—l型硬度计,在果实顶部、胴部对应两侧、萼部、胴部的近萼端 5个部位分别去皮进行测定。 1.4.4可溶性固形物的百分含量:用手持折光仪测定。 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构的影响 1.4.5果肉细胞结构观察:取果实近萼端部位的果肉,制成徒手切片,用B×10F4生物 显微镜观察并拍照。 2.2结果与分析 2.2.1超声波处理对果实腐烂率和腐烂指数的影响 30.00% 25.00% 20·oo。 S 精15.oo% 剁 龌10.00% 5.00% 卜,搦.蓁 雾 .圉.搦,豳 0.00% CK 1 5 10 20 25 30 1强 10强 时间/min O.30 O.25 O.20 鼎 襄015 惶 O.10 O.05 0.00 20 25 30 1强 10强 时间/min 图2—1超声波处理后柿果在(1±1)℃贮藏期间的腐烂率和腐烂指数 2_l Ofrotten Fjg witllultrasOundtreatmeⅡts Changes OfpersiⅡunons at1±1℃ dⅡ一ngstOnge 在1℃的低温下,贮藏至约50a时,观察到柿果出现腐烂现象(图2—1)。在同一处 min、5 理强度条件下(200w),除1min两处理外,对照和其它处理均发生不同程度的 腐烂现象,其中10min处理果的腐烂程度低于对照,而20min和25 min处理果的腐 烂程度高于对照;在相同处理时间条件下,250w处理(强度大)果的腐烂程度高于或接 新疆农业大学硕士学位论文 近于200w处理的果实。这些结果说明,超声波处理强度和时间的长短对柿果腐烂现象 ] 的发生有影响,短时间低强度的超声波处理有助于抑制果实的腐烂;本试验中卜5min 低强度超声波处理的柿果在1℃下贮藏65d未见腐烂。 2.2.2超声波处理对果实色泽的影晌 由表2—1所示,柿子在贮藏期间果面亮度(HunterL)随着贮藏期的延长而下降, 其变化幅度较小, 1min、20Ⅲin处理的果面亮度从35d起到贮藏结束一直低于对照, 5 min、lO min强处理的果面亮度除在35d外,其余贮藏时间内一直高于对照,贮藏结 束时, 5min处理的果面亮度最高,统计分析结果表明,各处理在整个贮藏期间差异显 著(P≤O.05),说明超声波处理对涩柿表面亮度有影响。 表2一l超声波处理后柿果在贮藏期间果皮色泽珏unterL的变化+ !!!!!i:!£§egg塑!!望!!!!!曼!!E£空i!!翌121 处理 贮藏天数/d ’IYeatInent O 22 50 65 注];十平均值士sE 表2—2超声波处理后柿果在贮藏期间果皮色泽Huntera、b的变化 nbIe2-2 ofH蛆tera、b wIth of uItrasoundtreatm蛆ts atl±l℃ Ch舳ges persi卫衄ons storage during CK 35.90a 31.84a31.18a”.53abc42.99a42.00ab37.37c34.37d 1Ⅱlin 28.81e 30.47a。27.63b26.93bc41.41bc39.92c 38.28c 34.67cd 5min 28.30e 29.73a29.58曲26.64bc41.94abc41.32abc39.11bc38.88ab 10min 32,06bcd32.37a3l。27a25。99c ‘41.15c41.17abc40.23ab33.25d 20min 33.94ab29.32a29.63ab28.Olab42.54abc 41.58abc41.07a 36.98bc :5min 34.49ab29.96a25.14c25.92c 41.32bc 42.11ab38.25c33.67d 30皿Ⅱ 29.33de3l43a29.24ab29-30a42.04abc40.50bc41.10a38.31ab 1 min强 32.50bc31.11a29.51ab29.41a 41.73abc42.44a 38.84bc39.89a 10 30.34cde30.08a27.97b miⅡ强 26.71bc42.78ab40.65abc38.21c 40.44a .15— 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显微结构的影响 [注]多重比较采用LsD方{击,不同小写字母袭示差异选是著水平(P≤0.05) min强、 a)逐渐降低(表2—2),其中l 柿子在贮藏期间,果实表面红色(Hunter 10 min强两处理果的变化趋势与对照相同,均呈逐渐下降的趋势,其他处理果的果面红 色除25min处理先下降然后再上升之外,其余均有先上升后下降的变化趋势,第22d、 50d、65d差异显著(P0.05)。对照果的果面黄色(Hunterb)在贮藏过程中逐渐下降 min、1 (表2—2),除了10Ⅲin、25min强处理的果实贮藏至35d,30Ⅲin处理的果实 贮藏至50d略有升高接着下降之外,其它处理的变化趋势与对照相同,各处理在贮藏过 程中差异显著(P0.05),说明超声波处理对涩柿红色和底色的变化有影响。 2.2.3超声波处理对果实硬度、可溶性固形物含量的影响 硬度是果实主要品质指标之一,它和果实的后熟衰老密切相关。柿子在贮藏期间, min、5min、30min、1 硬度逐渐降低,但降低幅度不大(表2—3),15d时1 min强处 理的硬度明显高于对照(PO.05),第22d各处理的硬度值出现升高的趋势,到贮藏结 束时,5min处理和1min强处理的果实硬度值明显高于对照(PO.05),各处理在整个 贮藏过程中差异显著(P0.05),说明超声波对果实的硬度有影响。表2—3所示,采收 min min、30 后柿子在贮藏期间,可溶性固形物含量的平均值变化幅度较小,相比之下25 处理果的降低幅度较其它处理降低幅度大,统计分析的结果表明,在整个贮藏期各处理 间差异显著(PO.05),可见超声波处理对果实中可溶性固形物含量的变化有影响。 表2—3超声波处理后柿果在贮藏期间果肉硬度、可溶性固形物含量韵变化 Table213 0f6r姗e嚣andsolublesoljdscontentof w.也ultmsound Changes persi衄ons 望塑塑坚垒!!塑鹜!!!!!g£e!!:!旦 处 理 贮藏天数/d Treatment 硬度(Kg/c岔) 可溶性同形物含量(%) 15 22 35 50 65 15 22 35 50 65 新疆农业大学硕士学位论文 2.2.4超声波处理对柿子集肉显微结构的影晌 柿果在贮藏过程中伴随果实硬度降低,果肉薄壁细胞发生了明显变化。第65d时 CK、10mn强、25min三个处理的果肉显微结构相似(图2—2a、b、c所示),相邻的 果肉薄壁细胞已分离,细胞排列较为松散,细胞内含物减少,但细胞壁仍保留,其中25 min、5min、10 d、e、 min处理的细胞轮廓没有CK、10min强清晰;而1 min(图2—2 f所示)处理的果肉细胞排列较为紧密,其中5min处理果肉细胞形状排列较其它两个 处理好,lmin处理虽然细胞之间排列紧密,但细胞形状不规则,10IIlin处理的果肉细 胞轮廓较模糊。这有可能是超声波处理时间过短或过长或者处理时强度过大造成的,表 明超声波处理对柿子果肉细胞形状的变化有影响。 a(CK) b(10miⅡ强) d(1ⅡIiⅡ) e(5miⅡ) “lOmin) , 图2一z超声波处理后贮藏至65d时(1±l℃)果肉细胞的显微结构 2-2Cellmicro-stnlctunwjthultrasound F.g tnatmentsat65dof at1±1℃ ofpe聃i衄ons storage 2.3结论与讨论 2.3.1本实验结果表明,在同一强度不同的处理时间,或者同一时间不同强度的超声波条 件下处理果实,对柿果的腐烂率和腐烂指数有不同的影响。在50kHz、200w的条件下 1min、5min、10 min处理可以明显降低果实腐烂现象的发生;在同样条件下,贮藏结 束时,5m{n处理的果实表面亮度最高,这三个处理对果实表面红色和底色的变化影响 超声波处理对果实采后品质和生理及果肉显,礅结构旮譬影响 不明显。 2.3.2在50kHz、200w的条件下,5min处理能够明显抑制果实硬度的降低,贮藏至65d kHz、250w 时其硬度明显高于对照,同样条件下25min处理的果实硬度低于对照,在50 的条件下,1Illin(强)处理的硬度高于对照,10min(强)处理的果实硬度低于对照, 5觚n处理的硬度高于1miIl(强)处理果实的硬度。可能是由于超声波在两种不同的作 用条件下,产生的空化作用改变了酶分子构象,促进细胞代谢过程中底物与酶接触,促 进产物的释放,从而促进了PG酶和PE酶的活性,加速了果胶组分变化,也有可能是 长时间或高强度的超声波处理破坏了涩柿表面的天然蜡质层,但其影响果实采后生理机 制尚有待进一步研究。 2.3.3在两种不同的处理条件下,果实的可溶性固形物含量平均值变化幅度较小,其中在 50】【}Iz、200w的条件下25min、30 min处理的果实中可溶性圆形物含蠢降低幅度较其 他处理大,统计分析结果表明,各处理间差异显著(PO.05),说明超声波处理对果实 中可溶性固形物含量有影响。该结论不同于姚松等m”单独的超声波处理未能引起鸭梨品 质变化的研究结论,与Seymollr嘲的研究结论也不一致。可能是在该作用条件下,超声 波的能量密度产生的空化效应改变了柿子的品质特性。 2.3.4有些果实,如猕猴桃“”1、葡萄“”1,当果肉软化时,薄壁细胞的细胞壁最终溶解消 失。本试验中,柿子软化时,细胞分离但细胞壁仍保留,而不是降解消失。这与经低温 min 漂烫硬化后的扁豆中显微结构观察到的结论相一致“驯。在本试验中CK、10min强、25 处理的显微结构相似,出现相邻的果肉薄壁细胞分离,细胞排列较为松散的现象,lmin、 5min、10 min处理的显微结构相似,果肉细胞排列较为紧密,其硬度的变化与果肉显 微结构的变化相一致。 2.3.5超声波处理条件的筛选试验结果表明,在50kHz、200w的条件下lmin、5min、 lO min处理的果实腐烂率较低,果肉硬度下降较缓慢,果肉细胞排列比较紧密,总体保 鲜效果较好。. 新疆农业大学硕士学位论文 第三章超声波处理对桃采后品质和生理及果肉显微结构的影响 3.1材料和方法 3.1。1试验材料 试验材料为北京地区主栽品种早熟“大久保” (锄施)桃和晚熟“八月脆” 育正常且大小、果重均匀的果实。 3.1.2试验处理 min,5lIlin、 采后果实用频率为50姐z(不可调),输出功率为200w,处理时间为1 10 nljn和对照(cK)共4个水平,处理后的果实经风干后装入纸箱中,每个纸箱内有 贮藏,每次取果6个进行澳8定。整个试验在北京农学院中心实验室和北京农学院食品系 实验室完成。 3.1.3测定内容及方法 3.1.3.1果实品质指标的测定 果实腐烂情况根据中华人民共和国商业行业标准【120】中桃贮藏技术所提供的标准进 行统计,褐变指数是参照Ben山ie等【1191的方法,将挑从缝合线切开。观察切面褐变的 定,结果以L、a、b值表示;果实的硬度用G Y-1型硬度计测定;果实可溶性固形物用 手持折光仪测定;果肉总酸用氨氧化钠滴定法测定。 3.1.3.2果实生理指标的测定和方法 3.1.3.2.1细胞膜透性的测定 取果实6个,用四号打孔器(直径为0.5 cm),从每个果实纵向打孔取出一果肉条, 用刀片将其切成3mm厚的圆片共100片,分装于4个小烧杯,每个烧杯中放25片, 5mjn微沸后,冷却至室温,测其电导率L2,计算相对电导率。相对电导率:(L1。k) 超声波处理对果实采后品质和生理厦果肉显徽结构的影响 /(k-b)‘100% 3.1.3.2.2脂氧合酶(LOx)活性的测定 脂氧合酶活性按Axelord等”2”的方法,略加改进。 磷酸缓冲液,冰浴匀浆,15000×g(4℃)离心15分钟,上清液用于LOx活性测定。 反应液的配制:将0.5 m1lm。l/L的NaOH,振荡,直至透明。在透 ml的亚油酸,混匀。在混合物中加入1.3 HCL m1,并用0.5m01/L 明溶液中加入90Ⅲ1的硼酸缓冲液,最后用蒸馏水定容到200 将pH值调至6.6。 mol/L,蚶6.0)2,5m1,酶液 测定:3m1反应体系中加入柠檬酸一磷酸缓冲液(O.1 0.2 nIn处测定吸光度变化。加酶液后 m1,反应液加入65pl,反应温度30℃,于234 15s开始计时,记录l珥in 次。LoX活性=∞∞≯V砰罐/(m搏晶卓v-震) 3.1.3.2.3过氧化物酶(POD)活性的测定 mol几pH6.O的磷酸缓冲液,匀 按朱广廉等”2”方法:取109果肉,加入适量0.2 ml磷酸缓冲液洗涤离 min,取上清液转入容量瓶,沉淀再加约5 浆,于40。o×g离心10 心两次,并入容量瓶,定容到5ml,即为粗酶液,备用。灭酶:取O.1m1定容好的酶液, m150m ml2% 加2.9 m01/LpH6.O磷酸缓冲液,在沸水中加热5min,冷却后加1.O m1 m120% min,立即加入2 过氧化氢和1.O 50mⅢ01/L愈创木酚,混合后在37℃水浴15 50mmol几 三氯乙酸终止反应,然后于470nm处测定吸光度oD值。未灭酶:取2.gml m1 ml50m 磷酸缓冲液,加1.0 2%过氧化氢、1.0 mol/L愈创木酚和O.1m1定容好的 ml nm 酶液,混合后在37℃水浴15min,立即加入220%三氯乙酸终止反应,然后于470 处测定吸光度oD值。以每克样品每分钟吸光度变化O.01为1个酶活力单位,即以O.Ol △OD(未灭酢一灭爵)/g·min表示。 3.1.3.2.4超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 冰浴匀浆,10000×g冷冻离心20分钟,取上清液保存在冰箱内备用。取5m1指形管4 m 甲硫氨酸中分别加入均以50 mol/LpH7.8磷酸缓冲液配制的3№ol/LEDlA,2.25 新疆农业大学硕士学位论文 ml “m01/LNBT和60岣ol/L核黄索各2m1,各个溶液均在用前配制,避光放置),加入1 酶液,混合后放在光照培养箱内光照10min,对照管中一支用磷酸缓冲液代替酶液,另 一支加入反应液后置于暗处,做空白,取1cm比色杯,于分光光度计上测量吸光度值, 读数于波长560 3.1.3.2.5超氧阴离子自由基(0。‘)的测定 m 7.8,内 按王爱国m”的方法(1990),称取果肉59,加入65mol几磷酸缓冲液0H ml 含O.1%PVP)6ml,冰浴匀浆,12000×g冷冻离心10分钟,取上清液lml,加0.9 m 磷酸缓冲液,加入O.1m110 mo扎的盐酸羟胺,25℃下反应20min。然后取培养液0.5 ml,加0.5 min,然后加同体积的正丁醇充分摇动,静置分层后取正丁醇相在530 nm处于分光光度 minl 址mol FW表示。 3.1.3.2.6过氧化氢酶(cAT)活性的测定 ml 酶液提取:称取果肉49置研钵中,加入34℃下预冷的pH7.O磷酸缓冲液和少 量石英砂研磨成匀浆后,转入50 m1容量瓶中,并用缓冲液冲洗研钵数次,合并冲洗液, 并定容到刻度。混合均匀将量瓶置5℃冰箱中静置10min,取上部澄清液在4000×g下 离心15min,上清液即为过氧化氢酶粗提液。5℃下保存备用。采用紫外吸收法测定。 m1 粗酶液、1.5 7.8磷酸缓冲液、1 Inl pH ml蒸馏水,25℃预热后,逐管加入O_3O.1mol/L 的H202,每加完一管立即记时,并迅
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